透射电镜（TEM）样本制备里📙，Pon 812环氧树脂包埋套装属于关键耗材，其与超薄切片质量直接相关联，并且和后续观察清晰度有关系🐋。

获取具备结构完整🫄🏼、反差良好这一特性的生物样品超微结构图像，其关键所在🛀🏿💂🏼‍♂️，乃是要挑选适宜的包埋套装，并且牢牢把控规范的包埋流程👩‍👧‍👦。

本文将围绕使用中的几个核心问题展开具体讨论🤷‍♀️。

Pon 812环氧树脂包埋套装如何正确配制与混合

812环氧树脂包埋套装的配制，要严格遵照试剂比例来开展，并且要依照顺序进行，是这样情况🤷🏼。

通常👩🏻‍🚀，套装里含有树脂单体👨🏽‍🎨，还有硬化剂，硬化剂是DDSA或者MNA🍉，另外还有加速剂，加速剂为DMP - 30。

进行配制操作时🍘，要先把树脂跟硬化剂充分地混合至均匀状态，搅拌所需要的时间得足够长，以此来防止出现局部聚合不均匀的情况，最后再添加加速剂，并且要迅速搅拌使其均匀👨🏿‍⚕️。

全过程都得在通风橱当中去操作💇‍♀️，防止试剂发散给人体带来影响，与此同时还要保证所使用的容器是干燥干净的，哪怕是极其微量的水分都会对最终树脂的固化硬度以及切片性能造成影响🚌。

使用Pon 812环氧树脂进行样品包埋的具体步骤

样品经前固定、漂洗、后固定及脱水后🕥，即进入渗透与包埋阶段。

关键在于渗透，要用到一种混合液，这种混合液是树脂与脱水剂构成的，需让树脂浓度呈梯度递增🤦🏻‍♀️，进而使树脂能够将细胞内的脱水剂完全置换出来后渗入组织🏋🏻‍♂️。

包埋之时🤹🏻‍♀️👩🏿‍🔬，把充分渗透了的样品放置到包埋模具里💇🏽，注入新近配制而成的树脂混合液，接着依据产品的说明，于适合的温度（好像是60°C）的情形下聚合24至48小时。

意昂5平台所给出的标准化包埋套装，以及详细操作指南💃🏿，能够对实验人员起到有效帮助，使其可以控制变量，进而减少人为误差。

Pon 812环氧树脂包埋块常见问题如何解决

包埋块制备完成以后，出现块体过软这样的状况👨🏿‍⚖️，或者过硬的情况，又或者内部存在气泡的情形👍，甚至切片时呈现易碎的这类问题🤹🏼，都是有可能碰到的。

块体要是过软2️⃣，常常和硬化剂比例偏低有关系🦸，或者与聚合温度不足有关⤵️，又或者和时间不够有关🦉；而要是过硬🚴🏿‍♂️，那就可能是加速剂过量导致的🦟，也可能是聚合温度过高造成的☎️。

气泡问题多源于混合时搅拌过于剧烈或渗透不彻底。

切片存在易碎的情况，这种情况下，要对脱水是不是完全进行检查🧏🏻‍♀️，或者思考考虑去调整树脂配方所具备的韧性。

系统记录每次配比和操作条件，是排查和解决问题的前提。

Pon 812环氧树脂与其他环氧树脂包埋剂相比有何特点

相较于Epon 812，还有Spurr树脂等别的常用环氧包埋剂🤱🏼，Pon 812在粘度方面👩🏿‍🍼，以及硬化速度方面👷🏽‍♀️，还有切割特性方面呈现出了一种平衡☝️。

它的粘度处于适中状态⭐️👊，方便对于多数生物组织进行渗透，固化之后的块体硬度呈现均匀态势，适宜切割五十到七十纳米的超薄切片，并且能够提供优良的电子反差🎰。

对于常规电镜实验室，它是一个可靠且性能稳定的选择✊⤴️。

然而，对于那种特别刚硬或者特别绵软的特殊构造，或许要试着去调整配方😷🦹，或者挑选更为专业的包埋介质💫。

当您运用Pon 812 环氧树脂包埋套装去开展样品制备工作之际，所碰到的最为棘手的挑战究竟是什么呢🚱？

是渗透不完全、切片带刀痕，还是聚合后块体品质不稳定？

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